直播內(nèi)容安排
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| 轉(zhuǎn)錄組班? | 無參轉(zhuǎn)錄組結(jié)題報告講解及常見數(shù)據(jù)挖掘? | 7.27（周二）? | 加入會議 |
| 微生物班? | 微生物多樣性結(jié)題報告講解及常見數(shù)據(jù)挖掘? | 8.3（周二）? | 加入會議 |
| 微生物班? | 微生物多樣性APP操作及常見問題解答? | 8.10（周二）? | ?加入會議 |
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本活動解釋權(quán)歸百邁客生物科技有限公司所有
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3、紀念品將在活動結(jié)束后工作人員將與您取得聯(lián)系，溝通派送事宜。
本活動最終解釋權(quán)歸北京百邁客生物科技有限公司所有
]]>會員卡2：任選6個生信課程，7000元/年/人
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會員權(quán)益
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6、購課折扣（超過會員卡內(nèi)的課程，每增加一個可享7折優(yōu)惠）
7、所有會員卡需在購買后1月內(nèi)選擇課程。
會員卡1、2所選的課程需在3個月內(nèi)兌換開通；
會員卡3、4所選課程在購買后6個月內(nèi)兌換開通。
注：1、所有課程有效期從開通之時開始計算。2、所選課程有未上線的，可在上線后2個月內(nèi)選擇開通。若上線課程在兌換開通時間內(nèi)，則此條無效。
8、課程視頻有效期一年
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注：表中直播時間為已確定的直播月份，后期會根據(jù)實際情況再次追加直播場次。
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套餐選課推薦
1、生信入門基礎課:零基礎R語言繪圖+生信入門課程（可組合：轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)挖掘+代謝蛋白生信課程）
2、基因組類課程：比較基因組學+基因家族分析課程（可組合：零基礎R語言繪圖+生信入門+GWAS+遺傳進化+重測序分析課程）
3、群體類課程：GWAS+遺傳進化課程+重測序分析課程（可組合：零基礎R語言繪圖+生信入門+比較基因組+基因家族分析課程）
4、轉(zhuǎn)錄調(diào)控類課程：轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)挖掘+代謝蛋白組學+ATAC分析課程（可組合：零基礎R語言繪圖+生信入門）
5、微生物多樣性課程：微生物多樣性生信分析課程+微生物數(shù)據(jù)挖掘課程（可組合：零基礎R語言繪圖+生信入門）
具體課程介紹
一、零基礎R語言繪圖課程
本課程主要是用R代碼來介紹方法的實現(xiàn)，實操性強。同時，本次課程會系統(tǒng)性對R語言基礎進行講解，讓大家對R語言形成一個整體的思路。現(xiàn)在開源的R代碼很多，了解了基礎構(gòu)建，后面拿到開源的代碼后就可以自己知道怎么修改，這些參數(shù)是什么了。對于后期R語言的自學是一個很好的敲門磚。
二、生信入門基礎課程
本課程主要針對沒有接觸過生信，而且沒有具體學習的生信方向，想了解入門生信的同學們。本課程涉及生信入門基礎的了解知識、常用的在線工具、以及涉及的幾種語言基礎介紹，讓你了解生信大概內(nèi)容，從而根據(jù)這些內(nèi)容了解自己想學習的方向，進而一步步細化去學習研究。
三、轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)挖掘生信課程
本課程主要針對轉(zhuǎn)錄組結(jié)果數(shù)據(jù)的挖掘分析，將從常用的轉(zhuǎn)錄組生信分析基礎入手，帶領大家學習轉(zhuǎn)錄組分析中常用的分析方案、個性化分析軟件及其實現(xiàn)方法，其中包含熱點的WGCNA分析，熱圖繪制，差異基因分類分析等繪圖分析。滿足轉(zhuǎn)錄組文章常見分析展示需求。
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四、代謝與蛋白組學生信課程
本課程主要針對代謝和蛋白組學結(jié)果數(shù)據(jù)進行挖掘分析，從代謝和蛋白組學結(jié)果文件入手，手把手教授個性化繪圖及分析技巧。
五、比較基因組生信分析課程
本課程主要從基礎生信操作開始，從已發(fā)表的NG、NC等高水平文章入手，帶領大家學習并實際操作高分文章中圖形及分析是如何實現(xiàn)的，學習比較基因組學常用的分析方法，從而滿足文章后期發(fā)表的需求。
六、基因家族生信分析課程
近年來基因家族的生物信息學分析已經(jīng)成為大家研究的熱點，目前已經(jīng)表明許多重要的基因，如一些轉(zhuǎn)錄因子，都是以基因家族的形式存在。本課程系統(tǒng)的對基因家族進行了生物信息分析，讓大家更加深入學習了解基因家族分析研究，從而進一步豐富我們研究的內(nèi)容，提升文章檔次，實現(xiàn)科研成果的快速產(chǎn)出。
七、GWAS生信分析課程
本課程主要從實踐入手，重點講解 GWAS 分析中用到的各種分析方法與常用分析軟件。包括群體結(jié)構(gòu)分析、主成分分析、親緣關系分析、連鎖不平衡分析、單體型分析等內(nèi)容。從原始數(shù)據(jù)開始，逐步完成分析內(nèi)容，并對分析內(nèi)容進行整理與挖掘，將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化成更直觀的圖形來展示最終的分析結(jié)果。若您想做、準備做或正在做GWAS相關的項目，那這個課程就很適合您，即可學會自己分析，同時了解分析過程中的參數(shù)設置，可以很好協(xié)助您的論文寫作。
八、微生物多樣性生信分析課程
本課程將微生物多樣性生信分析中的每一個步驟以及每一步驟所涉及的參數(shù)都很明確的列了出來，詳細為大家進行講解及實操演示，幫助大家更好的了解學習微生物多樣性分析的整個過程。
九、微生物多樣性數(shù)據(jù)挖掘分析課程
本次課程主要針對微生物多樣性數(shù)據(jù)的后期挖掘繪圖，主要利用R語言來進行微生物多樣性相關圖形的繪制，從而實現(xiàn)自己可以分析繪制圖形，更重要的是自己可以根據(jù)不同雜志的要求，很快得出對應的圖形。
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十、重測序生信分析課程
本課程主要針對基于二代及三代測序的重測序分析。以實際操作為主，從序列比對開始到突變位點的分析及應用。包括常用的分析方法及工具軟件（BWA、GATK、Plink等）。讓大家能夠快速上手有關重測序的相關分析并為后續(xù)與突變相關的高級分析打下良好的基礎。
十一、遺傳進化生信分析課程
本次課程主要講解群體遺傳進化分析中常見分析內(nèi)容以及定制化繪制相關圖形，同時涵蓋高級分析，基因流、分化時間、群體歷史動態(tài)三塊高級分析內(nèi)容。本課程主要面向初中級，且對遺傳進化分析有需求的老師。
十二、ATAC生信分析課程
本課程主要從技術原理、實驗步驟、生物信息學分析、文獻分享四大內(nèi)容向大家介紹ATAC-Seq技術。同時，本課程還涉及專門的生物信息學實操課程，帶領大家學習ATAC-Seq基本分析流程，其中包括數(shù)據(jù)質(zhì)控、Peak Calling、Motif分析等。從而幫助大家將ATAC-Seq運用在自己的課題當中。
基于樣品中的物種組成及豐度信息推測樣品中表型類型和功能組成及差異。包含PICRUSt2功能預測、FAPROTAX功能預測、BugBase表型預測、Tax4Fun2功能預測和真菌FunGuild表型預測。
一. PICRUSt2功能預測
PICRUSt1軟件依賴于Greengene數(shù)據(jù)庫進行物種比對、功能數(shù)據(jù)輸出。而Greengene數(shù)據(jù)庫在2013年之后就停止了更新，距今為止已有7年。隨著時間的推移，大量微生物基因組數(shù)據(jù)測序獲得，而停止更新的Greengene數(shù)據(jù)庫限制了PICRUSt的功能預測范圍。對于近年來測序獲得微生物功能功能信息無法進行預測，滿足不了當前的研究需求，為了補上這塊滿足科研工作者的需求，PICRUSt團隊于近期升級了軟件，正式公布了PICRUSt2。
1）將待預測的OTU代表序列置于軟件中已有的系統(tǒng)發(fā)育樹中，而不是直接對OTU序列進行分類學注釋；
2）不再基于GreenGene 16S數(shù)據(jù)庫進行功能預測，其用于預測的參考基因組數(shù)據(jù)庫相比先前也已擴大了10倍以上
參考文獻：Douglas G M, Maffei V J, Zaneveld J, et al. PICRUSt2: An improved and extensible approach for metagenome inference. bioRxiv, 2019.
功能組成分析：統(tǒng)計各樣品在不同分類層級上的功能組成。
注：橫坐標為樣品名稱；縱坐標為功能相對豐度百分比。
功能差異分析：統(tǒng)計各樣品或者各組在不同分類層級上的功能差異。
注：圖中不同顏色代表不同的樣品或分組。左圖所示為不同功能在兩個樣品或者兩組樣品中的豐度比例，中間所示為95%置信度區(qū)間內(nèi)功能豐度的差異比例，最右邊的值為校正后p值。
二. FAPROTAX功能預測
FAPROTAX較適用于對環(huán)境樣本的生物地球化學循環(huán)過程（特別是碳、氫、氮、磷、硫等元素循環(huán)）進行功能注釋預測。FAPROTAX是根據(jù)已發(fā)表的文獻手動構(gòu)建的數(shù)據(jù)庫，它把原核微生物的分類和代謝等功能對應起來，目前收集自4600多個原核微生物的80多個功能分組7600多條功能注釋信息。
參考文獻：Louca S, Parfrey L W, Doebeli M. Decoupling function and taxonomy in the global ocean microbiome[J]. Science, 2016, 353(6305): 1272-1277.
三. BugBase表型預測
BugBase是一種預測復雜微生物組內(nèi)功能途徑的生物水平覆蓋以及生物可解釋表型的方法。BugBase首先通過預測的16S拷貝數(shù)對OTU進行歸一化，然后使用提供的預先計算的文件預測微生物表型。包括以下七方面：革蘭氏陽性 （Gram Positive）、革蘭氏陰性 （Gram Negative）、生物膜形成 （Biofilm Forming）、致病潛力 （Pathogenic Potential）、移動元件含量 （Mobile Element Containing）、氧的利用 （Oxygen Utilizing）、氧化脅迫耐受 （Oxidative Stress Tolerant）。
參考文獻：Ward T, Larson J, Meulemans J, Hillmann B, Lynch J, SidiropoulosD,Spear J, Caporaso G, Blekhman R, Knight R, Fink R, Knights D. 2017.BugBase predicts organism level microbiome phenotypes. bioRxiv.
四. Tax4Fun2功能預測
Tax4Fun全面升級為Tax4Fun2.評估微生物群落的功能和冗余度是環(huán)境微生物學的主要挑戰(zhàn)。Tax4Fun2可基于16S rRNA基因序列快速預測原核生物的功能譜和功能冗余。通過合并用戶定義的、特定于棲息地的基因組信息，可以顯著提高預測功能圖譜的準確性。
優(yōu)點：
（1）不再局限于僅SILVA的特定版本注釋的OTU豐度表，允許直接以OTU代表序列作為輸入，通過與指定參考數(shù)據(jù)庫的比對實現(xiàn)物種注釋。除了Tax4Fun2提供的已構(gòu)建好的參考集（相比之前大幅擴大），也允許我們提供自定義的參考集，使用非常靈活。
（2）側(cè)重于原核數(shù)據(jù)，但也可以合并真核數(shù)據(jù)。
（3）提供了計算特定功能冗余的方法，對于預測特定功能在環(huán)境擾動期間丟失的可能性至關重要。
（4）精度和穩(wěn)定性顯著提升。
參考文獻：Wemheuer F, Taylor J A, Daniel R, et al. Tax4Fun2: a R-based tool for the rapid prediction of habitat-specific functional profiles and functional redundancy based on 16S rRNA gene marker gene sequences. bioRxiv, 2018.
五. FunGuild表型預測
FUNGuild(Fungi Functional Guild)是一種可用于由生態(tài)協(xié)會分類學解析真菌的工具，用簡單而一致的方法將大型序列庫分類為具有生態(tài)意義的類別。根據(jù)營養(yǎng)方式將真菌分為12類，然后構(gòu)建了一個真菌分類和功能分組（guild）之間的數(shù)據(jù)庫，通過這個數(shù)據(jù)庫你就可以對真菌進行功能分類。
病理營養(yǎng)型（pathotroph）：通過損害宿主細胞而獲取營養(yǎng)（包括吞噬型真菌phagotrophs）。
共生營養(yǎng)型（symbiotroph）：通過與宿主細胞交換資源來獲取營養(yǎng)。
腐生營養(yǎng)型（saprotroph）：通過降解死亡的宿主細胞來獲取營養(yǎng)。包括動物病原菌（animal pathogens）、叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi）、外生菌根真菌（ectomycorrhizal fungi）、杜鵑花類菌根真菌（ericoid mycorrhizal fungi）、葉內(nèi)生真菌（foliar endophytes）、地衣寄生真菌（lichenicolous fungi）、地衣共生真菌（lichenized fungi）、菌寄生真菌（mycoparasites）、植物病原菌（plantpathogens）、未定義根內(nèi)生真菌（undefined root endophytes）、未定義腐生真菌（undefined saprotrophs）和木質(zhì)腐生真菌（wood saprotrophs）。
參考文獻：Nguyen NH, Song Z, Bates ST, Branco, S, Tedersoo L, Menke J, Schilling JS, Kennedy PG. 2016. FUNGuild: an open annotation tool for parsing fungal community datasets by ecological guild. Fungal Ecology 20:241-248.
MicroPITA分析
在做完16S、18S或ITS等微生物多樣性研究后，我們常常還會想進一步了解微生物群落的功能。通常情況下，會采用宏基因組、宏轉(zhuǎn)錄組或宏代謝組等方法深入分析，但相對于擴增子測序，宏基因組等測序手段的價格還是相對較高，因此需要從已測完的樣本中再挑選合適的樣本進行宏基因組測序。可利用microPITA進行樣品預測，挑選出合適的樣品。該分析是基于大量微生物多樣性的數(shù)據(jù)，根據(jù)不同指標篩選出代表性樣本，以便于開展開展后續(xù)研究。
| 類型 | 方法 | 含義 | 樣本特點 |
| 無監(jiān)督方法 | diverse | 選擇α多樣性最高的樣本 | 生態(tài)多樣性高 |
| features | 根據(jù)目標物種挑選樣本 | 針對特定物種 | |
| extreme | 選擇β多樣性距離最遠的樣本 | 極端樣本 | |
| representative | 最能反映整體距離差異的樣本 | 核心樣本 | |
| 有監(jiān)督方法 | Distinct | 根據(jù)表型/分組特征，挑選組間β多樣性距離最大的樣本 | 依據(jù)表型/分組特征，選擇極端樣本 |
| Discriminant | 根據(jù)表型/分組特征，挑選離分組中心最近的樣本 | 依據(jù)表型/分組特征，挑選核心樣本 |
參考文獻：Tickle TL, Segata N, Waldron L, Weingart U, Huttenhower C. Two-stage microbial community experimental design. ISME J. 2013 Dec;7(12):2330-9. doi: 10.1038/ismej.2013.139. Epub 2013 Aug 15. PMID: 23949665; PMCID: PMC3834858.
群落結(jié)構(gòu)分析
微生物群落生態(tài)學的一個主要目標是了解構(gòu)成跨時空物種豐度模式的過程。確定性和隨機性兩種類型的過程會影響群落的聚集。確定性過程與生態(tài)選擇相關，隨機過程包括不可預測的擾動、概率性的散布和隨機的出生-死亡事件等，這些變化不是由環(huán)境決定的適應性結(jié)果。通過零模型量化群落的絕對系統(tǒng)發(fā)育距離與隨機系統(tǒng)發(fā)育距離的偏離度，偏離程度越大，群落受確定性因素的影響越大，偏離度越小，群落受隨機性因素的影響越大。通常使用βNTI（最近種間親緣關系指數(shù)）以評估不同時空尺度下隨機性和確定性過程對微生物群落組裝的影響。
其中，| βNTI |>2表示觀察到的兩個群落之間的更替主要由選擇控制，其中βNTI>+2與變量選擇一致，而βNTI<-2表示同質(zhì)選擇。因此，| βNTI |<2意味著一組群落的更替受擴散限制、均勻化擴散或未消除過程的控制。為了理清這些過程，Raup-Crick矩陣（RCbray）基于群落的標準Bray-Curtis矩陣構(gòu)建，提供有關所觀察到的流動程度是否明顯偏離預期的信息。這個值等于觀測到的Bray-Curtis和零分布之間的偏差，范圍是-1到+1。| RCbray |<0.95可以解釋為終止過程的影響。反過來，擴散限制加上漂移導致大于預期的周轉(zhuǎn)率（RCbray>+0.95），而RCbray<-0.95則表明群落組成的周轉(zhuǎn)率主要受均勻擴散控制。
參考文獻：Jizhong, Zhou, Daliang, et al. Stochastic Community Assembly: Does It Matter in Microbial Ecology[J]. Microbiology & Molecular Biology Reviews, 2017.
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發(fā)表期刊：Plant Biotechnology Journal
發(fā)表時間：2020年7月12
影響因子：8.1
研究內(nèi)容：棉花花芽分化
研究對象：兩個早熟品種，兩個晚熟品種；每個品種6個時期
研究方法：轉(zhuǎn)錄組測序
前言
陸地棉(Gossypium hirsutum L.)是世界上最重要的纖維作物。在我國黃河流域和長江流域棉區(qū)，實現(xiàn)早熟棉在小麥或者油菜后直播可以提高復種指數(shù)。而在西北內(nèi)陸棉區(qū)，春季氣溫低，秋季枯霜早，早熟棉既能提高棉花的霜前花率，還可以改善棉花品質(zhì)?；ㄑ糠只怯绊懚碳久奁贩N早熟的重要性狀，是棉花現(xiàn)蕾期、開花期和成鈴期發(fā)育的基礎，花芽分化直接影響開花時間?；ㄑ糠只侵参飶臓I養(yǎng)生長向生殖生長過渡的標志。當進入生殖生長時，側(cè)芽變成花芽，花芽發(fā)育成果枝。果枝分化決定了開花量、生殖能力和棉花產(chǎn)量。因此，早熟性狀及早熟棉品種在生產(chǎn)上顯得尤為重要。
結(jié)果
1、棉花莖尖的形態(tài)發(fā)育
圖1兩個早熟品種和兩個晚熟品種的比較
2、棉花不同發(fā)育階段的72個RNA文庫的轉(zhuǎn)錄組譜
?圖2早熟和晚熟品種六個發(fā)育階段之間的轉(zhuǎn)錄關系。
3、加權(quán)基因共表達網(wǎng)絡分析（WGCNA）
?圖3差異表達基因的WGCNA
4、棉花從營養(yǎng)生長向生殖生長轉(zhuǎn)換相關基因的鑒定
?圖4模塊MElightcyan的分析
5、GhCAL在調(diào)節(jié)從營養(yǎng)生長到生殖生長的轉(zhuǎn)換的功能驗證
百邁客云平臺可以在所有基因挖掘這里進行所有基因篩選和PCA聚類（動圖是示例數(shù)據(jù)）
然后作者利用高分文章利器：WGCNA分析，進行數(shù)據(jù)深度挖掘和整理，推薦大家使用百邁客云平臺小工具WGCNA模塊，可以出來和作者同樣高大上的圖片。
登陸百邁客云平臺—小工具，即可使用分析（動圖是示例數(shù)據(jù)）
然后作者根據(jù)一系列的功能驗證最終鎖定控制花芽分化的基因，再次推薦大家使用百邁客轉(zhuǎn)錄組個性化（所有基因挖掘，差異基因挖掘，基因結(jié)構(gòu)挖掘）三大模塊和小工具（108款分析繪圖工具），下一篇高分文章就是你！
作為一個科技服務工作者，自然能夠明白每一位老師的痛處和難點，不過現(xiàn)在都2020年了，再也不是一個轉(zhuǎn)錄組1萬元的天價了，那么現(xiàn)在從原始的測序數(shù)據(jù)到數(shù)據(jù)挖掘直至最后完美的SCI論文圖表，究竟是怎么出來呢？
雖然君子遠庖廚，不過今天小編將為您帶進后廚，為您娓娓道來。
1、首先我們需要原始數(shù)據(jù)
2、一分鐘的分析任務投遞
選擇合適的分析APP
命名和選擇數(shù)據(jù)
選擇參考基因組及設置差異分組
任務提交后，根據(jù)樣本數(shù)據(jù)量，一般24-48h左右大家就可以看到一份完整的分析結(jié)題報告和分析數(shù)據(jù)了。
講到這里可能有人會問：難道就這么簡單？那人家好幾篇文章里面那些高大上的圖片都是大神用小工具做的嗎，小編可以負責任的告訴你們，不是的！我們還有很多隱藏功能：
第一：基因檢索。（小編選的蛋白是PPR蛋白，從4萬多基因里面篩選出來60個PPR蛋白相關的基因，然后根據(jù)60個基因做GO分類圖）。
第二：WGCNA分析。這個分析主要是將基因模塊與表型數(shù)據(jù)或者表型樣本進行關聯(lián)，從而快速的鎖定一批候選基因。
運行后打開是下圖這樣的，對此圖有疑惑的可以點擊圖片左側(cè)的攝像頭。
第三：最近很火的差異基因表達趨勢分析
第四：108款分析繪圖工具(73款常用工具免費使用)。
具體這些工具如何使用？百邁客云還有哪些隱藏功能呢？歡迎大家持續(xù)關注，小編會定期為大家進行分享。
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下載谷歌瀏覽器，輸入網(wǎng)址https://international.biocloud.net/zh/user/login?，進入百邁客云平臺登錄界面，輸入賬號密碼登錄。賬號為手機號或者是郵箱，初始密碼為123.bmk.
二、選擇合適的分析平臺
百邁客云包含農(nóng)學和醫(yī)學兩大類分析平臺，醫(yī)學分析平臺主要針對人、鼠數(shù)據(jù)的分析，包含：轉(zhuǎn)錄組、非編碼RNA、單基因病外顯子、腫瘤外顯子、重測序等數(shù)據(jù)分析，以及全轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合分析；農(nóng)學分析平臺可以應用到更多的物種，涵蓋轉(zhuǎn)錄組、非編碼RNA、微生物、蛋白、代謝等數(shù)據(jù)的分析，以及全轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合分析等。點擊左側(cè)導航分析->農(nóng)學或者醫(yī)學打開分析平臺列表頁面，點擊選擇您想要使用的分析平臺，打開其詳細介紹頁面，該頁面可以看到該平臺的應用領域“平臺介紹“技術背景“案例“課堂“版本記錄，點擊打開軟件即可進入到參數(shù)頁面。
三、創(chuàng)建項目名稱
為了方便數(shù)據(jù)、任務和報告的管理，我們將同屬于一個項目的內(nèi)容會放到一個項目中，因此進行基本分析時需要先選擇一個項目，如果沒有項目也可以點擊+新建先創(chuàng)建一個項目，見下圖。
四、數(shù)據(jù)導入
針對FASTQ測序數(shù)據(jù)，選擇文件夾批量導入，雙端測序數(shù)據(jù)必須分別以_1.fq和_2.fq結(jié)尾，系統(tǒng)便會自動對數(shù)據(jù)進行配對，而且多個目錄中的文件可以分多次導入進來一起進行分析。（在本公司進行測序的數(shù)據(jù)會自動推送到您的賬戶下，數(shù)據(jù)所在文件夾名稱為合同編號）
導入數(shù)據(jù)之后，可以根據(jù)自己的需要修改樣品ID，由于此處設置的ID會體現(xiàn)在分析報告和分析結(jié)果中，因此請慎重考慮后再設置，分析完成后不可再次修改。如果平臺上還沒有您自己的數(shù)據(jù)，請參考數(shù)據(jù)上傳先將您的數(shù)據(jù)傳到云平臺上。
四、基本參數(shù)設置
一般在這里選擇生信流程版本、設置報告名稱等基本參數(shù)，如果對于參數(shù)設置沒有特殊要求，推薦使用默認參數(shù)。
五、選擇參考基因組（有參）
對于依賴參考基因組序列進行分析的平臺，一定要選擇和分析數(shù)據(jù)對應的參考物種及組裝版本，不同版本的參考基因組的詳細信息可以點擊基因組版本詳情進行查看。（一個項目只能使用一個版本的參考基因組進行分析）
六、基因功能注釋（無參）
- 組裝方式：
轉(zhuǎn)錄組組裝方式?jīng)Q定了后續(xù)Unigenes庫的構(gòu)建和表達定量的策略以及分析結(jié)果的可靠性.根據(jù)實際情況選擇轉(zhuǎn)錄組組裝方式。分開組裝是對每個樣品數(shù)據(jù)單 獨組裝；合并組裝是將所有樣品放在一起組裝；分組組裝適合于不同品種（或者是變異種）的組裝，將相同品種的樣品合并組裝，然后將每組的組裝結(jié)果 進行合并去冗余。合并組裝獲得的Unigene庫更完整、冗余度更低,因此Trinity官方亦推薦使用合并組裝，以便進行后續(xù)的表達定量和差異表達分析.
- 注釋物種
為了提高注釋分析的效率(縮短比對比對時間)以及獲得有效的注釋信息,在選擇注釋物種時,應盡量選擇包含物種最確切的數(shù)據(jù)庫.（如果分析物種為真菌類，一定要選擇真菌選項，否則會影響組裝效果）
七、差異分組設置
根據(jù)實驗方案設計以及樣品信息，進行分組的設置，流程據(jù)此進行差異比較分析，此處只支持兩組間比較，可添加多個差異分組。FDR值一般推薦選擇0.01，差異倍數(shù)閾值一般推薦選擇（此處的參數(shù)和差異分組在后期報告?zhèn)€性化中可再次進行修改）
八、生成標準分析報告
參數(shù)設置完成之后，可以點擊保存參數(shù)，方便之后進行重新分析或者基于本次參數(shù)進行修改后再次分析；一切準備就緒后，點擊提交將任務提交到百邁客云計算集群上，根據(jù)不同分析平臺、不同數(shù)據(jù)量等待大概2小時到3周的時間完成項目分析，獲取到標準分析報告。
報告查看，點擊項目（管理）?->?我的項目打開項目列表，找到之前提交任務時選擇的項目，點擊項目名稱打開該項目，即可看到新生成的分析報告記錄，點擊報告名稱查看詳細報告。
點擊報告右上角的項目結(jié)果下載，可以選擇下載HTML報告、PDF報告和結(jié)果數(shù)據(jù)（尾款結(jié)清后）。HTML報告只包括分析報告的html文件及一個src文件夾，展示了部分結(jié)果；PDF報告是根據(jù)HTML報告轉(zhuǎn)換而來，方便您進行報告打??；結(jié)果數(shù)據(jù)包含了項目中所有結(jié)果文件，一般比較大，會通過FTP進行下載，請耐心等待下載。
下載谷歌瀏覽器，輸入網(wǎng)址https://international.biocloud.net/zh/user/login?，進入百邁客云平臺登錄界面，輸入賬號密碼登錄。賬號為手機號或者是郵箱，初始密碼為123.bmk.
二、選擇合適的分析平臺
百邁客云包含農(nóng)學和醫(yī)學兩大類分析平臺，醫(yī)學分析平臺主要針對人、鼠數(shù)據(jù)的分析，包含：轉(zhuǎn)錄組、非編碼RNA、單基因病外顯子、腫瘤外顯子、重測序等數(shù)據(jù)分析，以及全轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合分析；農(nóng)學分析平臺可以應用到更多的物種，涵蓋轉(zhuǎn)錄組、非編碼RNA、微生物、蛋白、代謝等數(shù)據(jù)的分析，以及全轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合分析等。點擊左側(cè)導航分析->農(nóng)學或者醫(yī)學打開分析平臺列表頁面，點擊選擇您想要使用的分析平臺，打開其詳細介紹頁面，該頁面可以看到該平臺的應用領域“平臺介紹“技術背景“案例“課堂“版本記錄，點擊打開軟件即可進入到參數(shù)頁面。
三、創(chuàng)建項目名稱
為了方便數(shù)據(jù)、任務和報告的管理，我們將同屬于一個項目的內(nèi)容會放到一個項目中，因此進行基本分析時需要先選擇一個項目，如果沒有項目也可以點擊+新建先創(chuàng)建一個項目，見下圖。
四、數(shù)據(jù)導入
針對FASTQ測序數(shù)據(jù)，選擇文件夾批量導入，雙端測序數(shù)據(jù)必須分別以_1.fq和_2.fq結(jié)尾，系統(tǒng)便會自動對數(shù)據(jù)進行配對，而且多個目錄中的文件可以分多次導入進來一起進行分析。（在本公司進行測序的數(shù)據(jù)會自動推送到您的賬戶下，數(shù)據(jù)所在文件夾名稱為合同編號）
導入數(shù)據(jù)之后，可以根據(jù)自己的需要修改樣品ID，由于此處設置的ID會體現(xiàn)在分析報告和分析結(jié)果中，因此請慎重考慮后再設置，分析完成后不可再次修改。如果平臺上還沒有您自己的數(shù)據(jù)，請參考數(shù)據(jù)上傳先將您的數(shù)據(jù)傳到云平臺上。
！注：1.各組學導入數(shù)據(jù)樣本個數(shù)要一致
????2.circRNA數(shù)據(jù)選擇去核糖體建庫則與lncRNA共用一套數(shù)據(jù)，無需單獨導入（百邁客建庫方法為去核糖體建庫）；選擇去線性建庫則需要單獨導入數(shù)據(jù)
五、選擇樣本對應關系
為了方便后面的聯(lián)合分析內(nèi)容，需要將各RNA項目里的數(shù)據(jù)按照對應關系統(tǒng)一編號，有幾組對應關系則在左側(cè)添加幾組，再從右側(cè)的lncRNA樣品池和miRNA樣品池中選擇對應的樣本添加到分組。其中默認按鈕可以按照數(shù)字的順序快速添加對應關系。
六、選擇參考基因組
對于依賴參考基因組序列進行分析的平臺，一定要選擇和分析數(shù)據(jù)對應的參考物種及組裝版本，不同版本的參考基因組的詳細信息可以點擊基因組版本詳情進行查看。如果云上沒有您需要的參考基因組，您可以聯(lián)系對應的運營將您提供的基因組文件部署到云平臺上，供您使用。（注：一個項目只能使用一個版本的參考基因組進行分析）
七、參數(shù)設置
- 流程版本號可以選擇默認的最新版本
Lib_type為窗體頂端
- Lib_type ：lncRNA建庫方式，fr-firststrand表示測序數(shù)據(jù)中，reads2方向與轉(zhuǎn)錄本方向一致；fr-unstranded為非鏈特異性建庫；fr-secondstrand 表示read1方向與轉(zhuǎn)錄本方向一致(百邁客lncRNA的建庫方式為fr-firststrand）
- lncRNA分析中反式靶基因預測方法： 樣本少的時候可以選擇基于序列方法，樣本數(shù)較多（大于5）推薦使用基于共表達分析方法。
- miRNA的長度范圍和接頭序列可根據(jù)實際情況進行填寫，主要是為了過濾原始數(shù)據(jù)中的街頭，默認參數(shù)為百邁客使用的序列
- circRNA預測軟件：給出三種預測方法，CIRI和find_circ是兩個不同的預測軟件，可以分別選擇其中一個軟件進行預測，CIRI+find_circ是將兩個軟件預測的結(jié)果取交集作為最終的結(jié)果，（此選項可能會導致預測結(jié)果偏少）
八、差異分組設置
根據(jù)實驗方案設計以及樣品信息，進行分組的設置，流程據(jù)此進行差異比較分析，此處只支持兩組間比較，可添加多個差異分組。
DEseq2軟件適用于有生物學重復的項目，edgeR適用于無生物學重復的項目，選擇第一個，系統(tǒng)會自動識別項目類型選擇對應的軟件
- FDR值一般推薦選擇0.01，差異倍數(shù)閾值一般推薦選擇2.（此處設置的的參數(shù)和差異分組在后期報告?zhèn)€性化中可再次進行修改）
九、聯(lián)合分析參數(shù)
- 構(gòu)建共表達網(wǎng)絡的篩選條件為共表達相關性閾值和共表達相關性分析中顯著性閾值兩個參數(shù)，其中共表達相關性閾值越大，顯著性閾值越小，則條件越嚴格。
- 構(gòu)建ceRNA網(wǎng)絡的關系對的篩選條件為ceRNA超幾何檢驗fdr值、ceRNA超幾何檢驗p值、ceRNA共享的miRNA數(shù)目三個參數(shù)，其中fdr值和P值越小，共享miRNA數(shù)目越大則篩選條件越嚴格。
- 圖中參數(shù)為推薦參數(shù)
十、生成標準分析報告
參數(shù)設置完成之后，可以點擊保存參數(shù)，方便之后進行重新分析或者基于本次參數(shù)進行修改后再次分析；一切準備就緒后，點擊提交將任務提交到百邁客云計算集群上，根據(jù)不同分析平臺、不同數(shù)據(jù)量等待大概2小時到3周的時間完成項目分析，獲取到標準分析報告。
報告查看，點擊項目（管理）?->?我的項目打開項目列表，找到之前提交任務時選擇的項目，點擊項目名稱打開該項目，即可看到新生成的分析報告記錄，點擊報告名稱查看詳細報告。
點擊報告右上角的項目結(jié)果下載，可以選擇下載HTML報告、PDF報告和結(jié)果數(shù)據(jù)（尾款結(jié)清后）。HTML報告只包括分析報告的html文件及一個src文件夾，展示了部分結(jié)果；PDF報告是根據(jù)HTML報告轉(zhuǎn)換而來，方便您進行報告打?。唤Y(jié)果數(shù)據(jù)包含了項目中所有結(jié)果文件，一般比較大，會通過FTP進行下載
下載谷歌瀏覽器，輸入網(wǎng)址https://international.biocloud.net/zh/user/login?，進入百邁客云平臺登錄界面，輸入賬號密碼登錄。賬號為手機號或者是郵箱，初始密碼為123.bmk.
二、選擇合適的分析平臺
百邁客云包含農(nóng)學和醫(yī)學兩大類分析平臺，醫(yī)學分析平臺主要針對人、鼠數(shù)據(jù)的分析，包含：轉(zhuǎn)錄組、非編碼RNA、單基因病外顯子、腫瘤外顯子、重測序等數(shù)據(jù)分析，以及全轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合分析；農(nóng)學分析平臺可以應用到更多的物種，涵蓋轉(zhuǎn)錄組、非編碼RNA、微生物、蛋白、代謝等數(shù)據(jù)的分析，以及全轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合分析等。點擊左側(cè)導航分析->農(nóng)學或者醫(yī)學打開分析平臺列表頁面，點擊選擇您想要使用的分析平臺，打開其詳細介紹頁面，該頁面可以看到該平臺的應用領域“平臺介紹“技術背景“案例“課堂“版本記錄，點擊打開軟件即可進入到參數(shù)頁面。
三、創(chuàng)建項目名稱
為了方便數(shù)據(jù)、任務和報告的管理，我們將同屬于一個項目的內(nèi)容會放到一個項目中，因此進行基本分析時需要先選擇一個項目，如果沒有項目也可以點擊+新建先創(chuàng)建一個項目，見下圖。
四、選擇輸入文件
- 蛋白鑒定表格：蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定的結(jié)果表格。制表符分隔的文本文件，第一列為蛋白ID，其他列為樣品的表達量。對格式不清楚的可點擊查看示例下載示例文件。（百邁客項目的結(jié)果文件會直接推送到客戶賬號下，文件夾名稱為合同編號，可直接導入使用）
- 蛋白數(shù)據(jù)庫：蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定所用的數(shù)據(jù)庫。不同數(shù)據(jù)庫得到的蛋白ID格式不同。這里給出了常用的uniport數(shù)據(jù)庫和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫。如果需要和轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合分析，建議使用轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫,并且可以輸入轉(zhuǎn)錄組的注釋信息文件，百邁客的轉(zhuǎn)錄組項目會自動生成此文件，也可以下載示例查看具體的格式）。
五、綜合選項
- 流程版本：選擇最新的版本（目前為0）
- Kegg注釋物種分類：點擊下拉框選擇KEGG注釋所用的物種類別
- 報告名稱：可以自定義方便區(qū)分的報告名稱，可以使用默認名稱
- 物種名稱：支持自定義物種名稱，與后期生成的任務名稱相關聯(lián)
- 標準化方式：否：不進行標準化；總峰面積：表示每個樣本中的每個蛋白除以該樣本總的峰面積；加和方法：先計算單個樣本所有蛋白的sum值, 再用sum值除以幾個樣本sum值中最大的，得到偏差系數(shù)，最后用蛋白/樣本的偏差系數(shù)得到標準化后的值。此處iTRAQ項目數(shù)據(jù)已經(jīng)進行過歸一化，可以選擇否，lable-free項目推薦總峰面積
六、差異分組設置
根據(jù)實驗方案設計以及樣品信息，進行分組的設置，流程據(jù)此進行差異比較分析，此處只支持兩組間比較，可添加多個差異分組。
- pvalue值一般推薦選擇0.01，差異倍數(shù)閾值一般推薦選擇2.（此處設置的的參數(shù)和差異分組在后期報告?zhèn)€性化中可再次進行修改）
- 分組設置：有幾組生物學重復就在左側(cè)的分組池中添加相應數(shù)量的分組，再從右側(cè)的樣品池中選樣本加入相應的分組中，1個樣本只能屬于一個分組且一個分組的樣本數(shù)目不少于2個（這里需要修改分組名稱，分析完成后不可修改）
- 差異分組設置
根據(jù)實驗方案設計以及樣品信息，進行分組的設置，流程據(jù)此進行差異比較分析，此處只支持兩組間比較，可添加多個差異分組。（此處的參數(shù)和差異分組在后期報告?zhèn)€性化中可再次進行修改）
七、生成標準分析報告
參數(shù)設置完成之后，可以點擊保存參數(shù)，方便之后進行重新分析或者基于本次參數(shù)進行修改后再次分析；一切準備就緒后，點擊提交將任務提交到百邁客云計算集群上，根據(jù)不同分析平臺、不同數(shù)據(jù)量等待大概2小時到3周的時間完成項目分析，獲取到標準分析報告。
報告查看，點擊項目（管理）?->?我的項目打開項目列表，找到之前提交任務時選擇的項目，點擊項目名稱打開該項目，即可看到新生成的分析報告記錄，點擊報告名稱查看詳細報告。
點擊報告右上角的項目結(jié)果下載，可以選擇下載HTML報告、PDF報告和結(jié)果數(shù)據(jù)（尾款結(jié)清后）。HTML報告只包括分析報告的html文件及一個src文件夾，展示了部分結(jié)果；PDF報告是根據(jù)HTML報告轉(zhuǎn)換而來，方便您進行報告打??；結(jié)果數(shù)據(jù)包含了項目中所有結(jié)果文件，一般比較大，會通過FTP進行下載，請耐心等待下載。
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下載谷歌瀏覽器，輸入網(wǎng)址https://international.biocloud.net/zh/user/login?，進入百邁客云平臺登錄界面，輸入賬號密碼登錄。賬號為手機號或者是郵箱，初始密碼為123.bmk.
二、選擇合適的分析平臺
百邁客云包含農(nóng)學和醫(yī)學兩大類分析平臺，醫(yī)學分析平臺主要針對人、鼠數(shù)據(jù)的分析，包含：轉(zhuǎn)錄組、非編碼RNA、單基因病外顯子、腫瘤外顯子、重測序等數(shù)據(jù)分析，以及全轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合分析；農(nóng)學分析平臺可以應用到更多的物種，涵蓋轉(zhuǎn)錄組、非編碼RNA、微生物、蛋白、代謝等數(shù)據(jù)的分析，以及全轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合分析等。點擊左側(cè)導航分析->農(nóng)學或者醫(yī)學打開分析平臺列表頁面，點擊選擇您想要使用的分析平臺，打開其詳細介紹頁面，該頁面可以看到該平臺的應用領域“平臺介紹“技術背景“案例“課堂“版本記錄，點擊打開軟件即可進入到參數(shù)頁面。
三、創(chuàng)建項目名稱
為了方便數(shù)據(jù)、任務和報告的管理，我們將同屬于一個項目的內(nèi)容會放到一個項目中，因此進行基本分析時需要先選擇一個項目，如果沒有項目也可以點擊+新建先創(chuàng)建一個項目，見下圖。
四、選擇輸入文件
代謝定量文件：針對鑒定到的代謝物進行定量的結(jié)果表格。制表符分隔的文本文件，第一列為代謝物ID，其他列為樣品的表達量。對格式不清楚的可點擊查看示例下載示例文件。（百邁客項目的結(jié)果文件會直接推送到客戶賬號下，文件夾名稱為合同編號，可直接導入使用）
五、綜合選項
- 流程版本：選擇最新的版本（目前為0）
- Kegg注釋物種分類：點擊下拉框選擇KEGG注釋所用的物種類別
- 報告名稱：可以自定義方便區(qū)分的報告名稱，可以使用默認名稱
- 物種名稱：支持自定義物種名稱，與后期生成的任務名稱相關聯(lián)
- 標準化方式：否表示不使用歸一化，總峰面積歸一化表示每個樣本中的每個代謝物除以該樣本總的峰面積，內(nèi)標則是每個代謝物除以內(nèi)標代謝物的峰面積且默認內(nèi)標的代謝物定性名稱為IS，內(nèi)標不參與后續(xù)的分析。（LC推薦使用總峰面積，GC推薦使用內(nèi)標）
六、差異分組設置
根據(jù)實驗方案設計以及樣品信息，進行分組的設置，流程據(jù)此進行差異比較分析，此處只支持兩組間比較，可添加多個差異分組。
- 推薦閾值選擇：（1）差異倍數(shù)閾值1、T檢驗p值0.05、VIP值1 （2）差異倍數(shù)閾值2、T檢驗p值1、VIP值1
（其中vip值采用了正交偏最小二乘法判別分析（OPLS-DA），該分析會給每個代謝物一個變量投影重要度VIP值，值越大說明代謝物的差異越顯著）
- 分組設置：有幾組生物學重復就在左側(cè)的分組池中添加相應數(shù)量的分組，再從右側(cè)的樣品池中選樣本加入相應的分組中，1個樣本只能屬于一個分組且一個分組的樣本數(shù)目不少于2個。（這里需要修改分組名稱，分析完成后不可修改）
- 差異分組設置：根據(jù)實驗方案設計以及樣品信息，進行分組的設置，流程據(jù)此進行差異比較分析，此處只支持兩組間比較，可添加多個差異分組。（此處的參數(shù)和差異分組在后期報告?zhèn)€性化中可再次進行修改）
七、生成標準分析報告
參數(shù)設置完成之后，可以點擊保存參數(shù)，方便之后進行重新分析或者基于本次參數(shù)進行修改后再次分析；一切準備就緒后，點擊提交將任務提交到百邁客云計算集群上，根據(jù)不同分析平臺、不同數(shù)據(jù)量等待大概2小時到3周的時間完成項目分析，獲取到標準分析報告。
報告查看，點擊項目（管理）?->?我的項目打開項目列表，找到之前提交任務時選擇的項目，點擊項目名稱打開該項目，即可看到新生成的分析報告記錄，點擊報告名稱查看詳細報告。
點擊報告右上角的項目結(jié)果下載，可以選擇下載HTML報告、PDF報告和結(jié)果數(shù)據(jù)（尾款結(jié)清后）。HTML報告只包括分析報告的html文件及一個src文件夾，展示了部分結(jié)果；PDF報告是根據(jù)HTML報告轉(zhuǎn)換而來，方便您進行報告打?。唤Y(jié)果數(shù)據(jù)包含了項目中所有結(jié)果文件，一般比較大，會通過FTP進行下載，請耐心等待下載。
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